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L-DOX的制備及F-DOX/T-DOX的分離提取實驗簡述

時間:2023-11-01 11:27:31       瀏覽:128
L-DOX的制備:
L-DOX的脂質組成為HSPC/膽固醇/DSPE-PEG2000(11:8:1mol/mol)。阿霉素脂質體是通過遠程加載制備的,它由跨膜硫酸銨梯度驅動。脂質體中DOX的濃度為2 mg/mL。采用Sephadex G50尺寸排除柱測定DOX脂質體的封裝效率。采用UPLC-MS/MS系統分析DOX的濃度。DOX和內標(IS)(柔紅霉素)檢測為帶電離子。


F-DOX和T-DOX的分離和提取:
采用Oasis HLB柱,采用SPE方法從E-DOX中分離血漿中的F-DOX。在沒有真空的情況下,裝載離子體樣品。然后用水清洗HLB柱,然后用乙酸的甲醇洗脫,以洗脫吸附在HLB柱上的F-DOX。洗脫后的溶液用氮氣干燥,殘渣用初始流動相重懸。采用液-液萃取(LLE)提取血漿中的T-DOX硼酸鹽緩沖液加入樣品,用氯仿提取,然后濃縮。有機層用氮氣干燥,用初始流動相重組。


F-DOX、T-DOX和IS的色譜圖
(A)不添加DOX和IS的空白血漿樣品;
(B)LLOQ樣品;
(C)靜脈注射后采集的真實血漿樣本。
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