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瑞禧生物分享:可逆性/淡黃色/GRB羅丹明標記葡萄糖苷與螺環結構/淺白色/SiRB-2-Glu硅基羅丹明近紅外/熒光探針的制備過程
今天瑞禧生物小編分享兩個顏色的羅丹明熒光探針,一起看看吧:
螺環結構/淺白色/SiRB-2-Glu硅基羅丹明近紅外/熒光探針:
將化合物SiRB-2 (43 mg, 0.1 mmol),HATU (152 mg, 0.4 mmol)和DIEA(66 _L, 0.4 mmol)溶解在DMF (4 mL)中并將混合物在氬氣氛下,0C攪拌10 min,然后,將Boc-Glu-OtBu (121 mg,0.4 mmol)溶于DMF (0.5 mL)中,逐滴緩慢加到上述溶液中。反應液在室溫下攪拌8 h.蒸發溶劑后,將殘余物溶于CH2Cl2和TFA(2 mL/2 mL)中。將反應液在室溫下攪拌2 h。減壓去除溶劑,硅膠柱色譜純化殘留物(石油醚:乙酸乙酯=4:1),得到SiRB-2-Glu(淺白色固體,37 mg,67%)。
可逆性/淡黃色/GRB羅丹明標記葡萄糖苷熒光探針:
稱取250 mg化合物3、170 mg 1-O-丙炔基-2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-葡萄糖苷于100 mL的圓底燒瓶中,加入20 mL V(甲醇):V(水)=4:1混合溶液,全部溶解之后加入165 mg 五水硫酸銅、175 mg抗壞酸鈉,在氮氣保護下,反應10 h。反應結束后,抽濾,減壓旋干,備用。取10 mL甲醇溶液于100 mL圓底燒瓶中,加入0.5 g 金屬鈉,全部溶解之后,加入上面減壓旋干的粉末,室溫反應6 h。過濾,減壓旋干,用20 mL V(甲醇):V(水)=1:9混合溶液溶解,用二氯甲烷萃取(3×20 mL),合并有機相,濃縮,以硅膠柱層析純化,洗脫劑為V(甲醇):V(二氯甲烷)=10:1,得淡黃色固體。
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