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瑞禧科研-GPI錨定蛋白修飾細胞膜的研究

時間:2022-08-16 16:24:15       瀏覽:2426

GPI錨定蛋白(GPI-anchored protein, GPI-AP)是一類通過其羧基末端的糖基化磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidy-1-inositol ,GPI)結構錨定于真核細胞膜表面的蛋白。


下面瑞禧生物小編和大家一起來了解一下 GPI錨定蛋白的細胞膜表面修飾的內容。

隨著對GPI錨定蛋白研究的不斷深入,人們開始利用GPI/格傳統的跨膜型表面蛋白罐定于細胞表面以發揮其功能,逐步建立了GPI錨定蛋白轉移法細胞表面左程技木的。該技術主要包括以下幾個方面:①構建感興趣蛋白與GPI信號肽的融合分子:②GPI錨定蛋白的表達和純化;③GPI錨定蛋白的轉移和細胞表面修飾。根據對蛋白質側向活動性的不同要求,人們所嵌合的GPE信號肽所附帶的氨基酸序列的長度也不一致。

目前,人們所采用的AF、堅LA.P(Placextal alkalire. pbosphataser ,胎盤堿性磷酸酶)等天然錨定蛋白質的羧基端GF核信號肽,都有不同的長度[g。嵌合性cDNA構建到合適的真核表達載體后,轉染真核細胞,如 CHO 細胞系等,可篩選到高表達的細胞株。有研究報道,如果載體中含有GSDHFR基因,就可以用MSXMTX進行加壓篩選,更容易獲得高表達的細胞株。有研究報道,用GS真核表達系統,10:細胞中,可得到 100ug GPI 錨定蛋白。

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