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基于金納米顆粒的細胞膜熒光探針具有如下通式:其中,R為氨基酸殘基,X為熒光基團。本發明的基于金納米顆粒的細胞膜熒光探針是具有生物靶向性和特異性高的納米材料,能實現熒光探針的細胞膜靶向作用,為細胞膜新的檢測手段的發展做出貢獻。
下面瑞禧生物小編和大家一起來看基于金納米顆粒的細胞膜熒光探針的制備方法:制備含化合物b(即疏基丙酸修飾的金納米顆粒b)的溶液,MES調節pH值 為6 - 7,加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)和N-羥基琥珀酰亞胺 (NHS),反應30min,再加入氨基酸-多胺衍生物a,然后于20 - 45°C反應24 h,固液分離獲得 化合物c;將化合物c溶于三蒸水中,與FITC(異硫氰酸熒光素)或BODIPY(氟硼熒染料)的二 甲基甲酰胺(DMF)溶液混合后,于20 - 45°C反應12 - 24 h后,離心得到氨基酸-多胺衍生物 修飾的金納米顆粒d或e。
氨基酸-多胺衍生物a的制備:以制備色氨酸-多胺衍生物為例,圓底燒瓶中先加入0.45 m〇L 1,4_二溴丁烷 和100 m〇L丙酮,攪拌下分批加入27.7 g鄰苯二甲酰亞胺鉀鹽,攪拌回流反應12 h,冷卻,過 濾除去反應生成的KBr,減壓蒸去丙酮和過量的1,4_二溴丁烷,剩余物用無水乙醇重結晶, 然后溶于60 mL乙腈中,加入10 mmoL色氨酸、20 mmoL K2CO3,在室溫下攪拌15 min,隨后升 溫至70 °C,反應過夜后冷卻,溶液中有大量白色不溶物,過濾除去,減壓蒸除乙腈,得淡黃 色油狀物,通過層析柱分離提純得到黃色化合物;
把該黃色化合物用少量乙醇溶解置于圓 底燒瓶中,緩慢滴加10當量的水合肼,室溫攪拌過夜,有大量白色固體析出,用濾紙過濾除 去白色固體,得淡黃色濾液,減壓蒸除乙醇,得黃色油狀物,通過葡聚糖層析柱分離提純的 化合物a。制備其它氨基酸-多胺衍生物時,只需要將色氨酸替換為相應的氨基酸即可。
序號 | 新聞標題 | 瀏覽次數 | 作者 | 發布時間 |
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