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cRGD靶脂質(zhì)體免疫原性細(xì)胞釋放和檢測(cè)圖譜簡(jiǎn)析

時(shí)間:2023-10-24 16:57:59       瀏覽:150

在用2Cl,3×lipo 2Cl 和3×cRGD-lipo 2Cl 處理5小時(shí)后,用化學(xué)發(fā)光法評(píng)估 UVA 激活后的細(xì)胞外 ATP 水平(圖a-b)。所使用的濃度是基于測(cè)定的細(xì)胞毒性活性的 IC50,IC90和2×IC90值 ,其僅在2Cl,3×lipo 2Cl 和3×cRGD-lipo 2Cl 中具有相當(dāng)?shù)募?xì)胞2Cl 水平基于定量分析的結(jié)果。顯示即使在低500nM (IC90)濃度下,3×cRGD-lipo 2Cl 在 UVA 激活后1和/或2小時(shí)顯著誘導(dǎo) ATP 的釋放(圖a)。另一個(gè)處理產(chǎn)生高水平的細(xì)胞外 ATP 是3×脂質(zhì)2Cl 在1.2 mM 濃度(2-IC90)在 UVA 激活后2小時(shí)。僅2Cl 和空脂質(zhì)體對(duì)照都不產(chǎn)生任何高水平 ATP。

此外,在所有處理中,5小時(shí)內(nèi)沒有檢測(cè)到顯著增加的細(xì)胞外 ATP 水平,提示脂質(zhì)體2Cl 釋放 ATP 可能是一個(gè)爆發(fā)性釋放事件。類似地處理 H22細(xì)胞,除了使用300nM 濃度的3×Lipo 2Cl 和3×cRGD-lipo 2Cl 作為最高濃度,因?yàn)?H22細(xì)胞對(duì)0.10 mg/mL 的脂質(zhì)體濃度敏感。在 UVA 激活后2小時(shí)內(nèi),H22細(xì)胞經(jīng)2Cl 處理均可產(chǎn)生高水平的胞外 ATP。



CRGD 靶向脂質(zhì)體系統(tǒng)促進(jìn)免疫原性細(xì)胞死亡標(biāo)志物 ATP 和 HMGB1的細(xì)胞外檢測(cè)圖。
(a)-(b)脂質(zhì)體2Cl 溶液處理后 ATP 的釋放和在 MCF-7細(xì)胞和 H22細(xì)胞中通過化學(xué)發(fā)光測(cè)定的光激活; 
(c)-(d)脂質(zhì)體2Cl 溶液處理后2小時(shí) HMGB1的細(xì)胞外釋放和通過 ELISA 方法在 MCF-7細(xì)胞和 H22細(xì)胞中的光激活(* P < 0.01)。

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