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CLV3是一種分泌性的多肽，在加工分泌過程中被水解為12個氨基酸組分的活性多肽。科研團隊一直在尋找分子量更小的量子點作為CLV3的熒光標簽，為解決這一問題，有科研學者提供了一種CLV3十二肽修飾的CdTe量子點的制備方法，采用該量子點所制備的熒光探針，瑞禧生物小編為大家分享如下：

CLV3十二肽修飾的CdTe量子點的制備方法，包括以下步驟:

(I) 、采用一鍋法合成CdTe量子點；(2)、采用芴甲氧羰基固相肽合成法合成CLV3十二肽，采用反向HPLC進行純化，純化后制得純度大于98%的CLV3十二肽，其氨基酸序列為NH2-RTVPSGPDPLHH-C00H ； (3)、采用零距離偶聯法將CLV3十二肽連接到量子點CdTe的表面，從而制得CLV3十二肽修飾的CdTe量子點。
所述步驟(1)中，CdTe量子點的合成方法具體如下:首先將CdCl2溶液與巰基乙酸混合均勻，并在混合液中持續通入高純氮氣保持混合液冒泡狀態；然后采用堿性溶液將混合液的PH調節至堿性，直至混合液變澄清后停止調節；將檸檬酸三鈉和Na2TeO3溶液添加至混合液中，最后加入NaBH4,混合均勻后得到反應液，并停止通入氮氣；將反應液移置反應爸中,在95-105°C的條件下反應l-2h ;反應結束后在反應液中加入過量丙酮,生成沉淀,將沉淀離心分離后收集，所得沉淀即為CdTe量子點，最后將沉淀用超純水重懸后放置于冰箱中冷藏。
所述步驟⑵中，采用ABI433A型多肽合成儀進行合成，純化時采用反相HPLC進行，反相HPLC包含兩個溶劑輸送泵，檢測波長為220nm，多肽純度用220nm紫外吸收值測定和全離子液相色譜-質譜的方法的分析。
所述的零距離偶聯法的步驟如下:將碳化二亞胺、N-羥基硫代琥珀酰亞胺、2-嗎啉乙磺酸緩沖液以及去離子水加入到CdTe量子點溶液中，攪拌反應后制得混合物；將混合物離心除去過量的試劑，所剩余的沉淀用雙蒸水洗滌后，再向沉淀中加入CLV3十二肽、雙蒸水以及硼酸鈉緩沖液，得到混合溶液；將混合溶液用超聲波在25°C條件下溫育2h，然后將混合溶液在4°C條件下儲存過夜，混合溶液中過量的多肽通過離心的方法除去，即可制得CLV3十二肽修飾的CdTe量子點。

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