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陽離子脂質(zhì)體的構(gòu)成：

將細(xì)胞轉(zhuǎn)染素制備成陽離子脂質(zhì)體通常需要中性或兼性輔助脂與之結(jié)合,如二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、磷脂酰膽堿(PC),這些中性磷脂起到穩(wěn)定雙層膜和降低陽性成分毒性的作用,同時(shí)提供陽性脂質(zhì)的細(xì)胞滲透功能。DOPE是應(yīng)用最廣的中性磷脂,它具有很強(qiáng)的細(xì)胞膜去穩(wěn)定化作用,在陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染中起到關(guān)鍵作用。

陽離子脂質(zhì)體的制備：

通常是光將細(xì)胞轉(zhuǎn)染素和中性脂質(zhì)溶解混合,經(jīng)反相蒸發(fā)后加入水或含水的混合溶液,再用漩渦和咸超聲振蕩的方式來制成懸液。用 DOTMA類似體制備的陽離子脂質(zhì)體一般是等摩爾比的細(xì)胞轉(zhuǎn)染素和 DOE在室溫下混合,用漩渦振蕩制成較大的多層膜囊泡,然后用超聲振蕩形成適于基因轉(zhuǎn)染的小的單層膜囊泡。但陽離子脂質(zhì)體Lipo-fectAM NE中 DOSPA: DOPE為 3: 1,而用DOTAP制備的脂質(zhì)體不加中性脂質(zhì)也有轉(zhuǎn)染活性。膽固醇衍生物類脂質(zhì)體通常也是細(xì)胞轉(zhuǎn)染素與 DOPE按不同摩爾比率制成,但由亞精胺膽固醇構(gòu)成的Transfectall卻不含輔助脂。研究表明用油水乳劑制備陽離子脂質(zhì)體能獲得更好的穩(wěn)定性,可減少血清對(duì)脂質(zhì)體的抑制作用。用凍融薄膜法制備的陽離子脂質(zhì)體被認(rèn)為有較好的包埋率和較大的脂質(zhì)體顆粒。

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