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Streptavidin-thiol鏈霉親和素通過巰基鍵合于固相載體的方法

時間:2021-10-11 15:19:46       瀏覽:520
1、一種新型鏈霉親和素純化填料,其特征在于:所述固相載體為聚合物微球、瓊脂糖凝膠、磁性微球和多孔板表面載體。
2、其合成步驟如下∶(1)填料活化∶反應體系中瓊脂糖凝膠微球占30%-50%、環氧氯丙烷占5-20%、1-2MNaOH,反應溫度為20-40度,反應時間2-6小時。(2)配體偶聯∶在步驟1反應后的體系中加入5Omg/ml咪唑琳酮類化合物的配體、0.1MNaCO ,pH調至8-10,反應溫度20-50度,反應時間8-24小時。(3)封閉反應∶在步驟2反應后的體系中加入1M乙醇胺,pH調至8.5,溫度在25-40度反應1小時,然后用去離子水清洗,即得到純化鏈酶親和素的親和吸附填料。
3、所述步驟(2)中的咪唑啉酮類化合物為1-(2-氨基乙基)-2-咪唑琳酮或1-氨基咪唑烷酮。
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