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Alexa Fluor 647 Biotin,AF647 生物素的反應(yīng)步驟

時(shí)間:2025-07-11 10:58:01       瀏覽:7

Alexa Fluor 647 Biotin,AF647 生物素的反應(yīng)步驟

Alexa Fluor 647 Biotin是將近紅外熒光染料Alexa Fluor 647與生物素偶聯(lián)的產(chǎn)物,結(jié)合了高靈敏熒光檢測和生物素-親和素體系的高親和力,用于細(xì)胞表面分子的標(biāo)記和檢測。

反應(yīng)步驟:
準(zhǔn)備反應(yīng)試劑
Alexa Fluor 647 Biotin通常以NHS酯形式存在,活性高,易與蛋白質(zhì)氨基結(jié)合。
待標(biāo)記的細(xì)胞表面蛋白質(zhì)或分子需要含有可反應(yīng)的游離氨基(如賴氨酸殘基)。
緩沖體系選擇
反應(yīng)常在pH 7.4–8.5的磷酸鹽緩沖液(PBS)中進(jìn)行,保證NHS酯的穩(wěn)定性和蛋白質(zhì)的活性。
偶聯(lián)反應(yīng)
將Alexa Fluor 647 Biotin溶解于DMSO或緩沖液中,緩慢加入蛋白質(zhì)溶液中。
室溫下反應(yīng)1-2小時(shí),輕柔搖晃確保充分接觸。
反應(yīng)終止與純化
反應(yīng)結(jié)束后,可通過透析、凝膠過濾或離心柱去除游離染料,獲得純凈的標(biāo)記蛋白。
純化后產(chǎn)物穩(wěn)定,適合后續(xù)細(xì)胞標(biāo)記。
細(xì)胞標(biāo)記
標(biāo)記后的蛋白通過生物素-親和素體系與細(xì)胞表面靶點(diǎn)結(jié)合,實(shí)現(xiàn)熒光成像。
適合固定或活細(xì)胞,結(jié)合熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)檢測。
產(chǎn)品名稱:Alexa Fluor 647 Biotin,AF647 生物素
純度:95%+
規(guī)格:mg/g
用途:科研

狀態(tài):固體/粉末/溶液


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