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AlexaFluor350 Phalloidin的合成及純化過程
AlexaFluor350 Phalloidin是菲洛毒素與Alexa Fluor 350染料的共價偶聯產物,專用于高分辨率熒光顯微鏡下神經元細胞骨架F-actin的觀察,能夠揭示細胞形態與動力學。
合成過程概述:活性染料制備
Alexa Fluor 350以其NHS酯形式提供活性羧基,便于與蛋白質或肽類含有的氨基結合。
菲洛毒素氨基活化
菲洛毒素分子含有可反應的伯胺基團,通常存在于賴氨酸殘基側鏈,作為NHS酯偶聯的位點。
偶聯反應
將Alexa Fluor 350 NHS酯在緩沖液(pH 7.4–8.5)中與菲洛毒素混合,常溫反應數小時,形成穩定的酰胺鍵。該過程需在無光條件下進行,以避免染料光降解。
純化步驟
通過高效液相色譜(HPLC)分離未反應的游離染料和多余反應物,獲得純凈的AlexaFluor350 Phalloidin。純化后的產物以凍干保存,避免水解。
質量確認
采用質譜(MALDI-TOF或ESI-MS)和紫外-可見光譜驗證標記成功及染料比例。
應用優勢:
該偶聯物因其藍光激發波長(約346 nm)和短波長發射,適合多色成像實驗,尤其在神經細胞內復雜骨架結構的動態追蹤中發揮重要作用。AlexaFluor350 Phalloidin提供了高靈敏度、低背景的熒光信號,是細胞骨架研究的重要工具。
產品名稱:AlexaFluor350 Phalloidin
純度:95%+
規格:mg/g
用途:科研
狀態:固體/粉末/溶液
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